Особенности определения гемоглобина в крови, основные методы диагностики и лечения патологических состояний

Содержание

Общеклиническое исследование крови

Особенности определения гемоглобина в крови, основные методы диагностики и лечения патологических состояний

Дата создания: 2014/04/02

Лежайкин Виталий

Различают общеклинические, биохимические и иммунологические исследования крови. Цель общеклинического исследования крови – количественное и качественное изучение форменных элементов крови (эритроцитов, лейкоцитов, тромбоцитов), определение количества гемоглобина (Нв), скорости оседания эритроцитов (СОЭ).

Клеточный состав крови здорового человека достаточно постоянен, поэтому его изменения указывают на те или иные патологические процессы в организме.

Однако даже у здорового человека могут наблюдаться некоторые колебания состава крови в течение суток под влиянием пищи, физической нагрузки, количества принятой жидкости.

Для устранения влияния этих факторов кровь для исследования следует брать при одинаковых условиях в одно и тоже время (утром натощак) из пальца.

В лабораторной практике исследуют чаще капиллярную кровь, которую получают путем укола в мякоть 4 пальца левой руки или мочки уха. Укол производят иглами – скарификаторами. Кровь из ранки должна вытекать свободно, так как при сильном надавливании на палец возможно примешивание тканевой жидкости, приводящее к искажению результатов анализа.

Не рекомендуется брать кровь сразу после физической (и умственной) нагрузки, физиотерапевтических процедур, рентгенологического исследования и т.д. Повторные исследования желательно проводить в одни и те же часы, поскольку морфологический состав крови подвержен колебаниям на протяжении суток.

Клиническое значение определения гемоглобина

Предложено много методов определения концентрации гемоглобина.

Нормы гемоглобина: для женщины 12-14 г %(120-140г/л), для мужчин 13-16 г % (130-160 г/л).

Понижение концентрации гемоглобина в крови (олигохромемия) наблюдается при анемиях различной этиологии (в результате кровопотерь, дефицита железа, витамина В12 и фолиевой кислоты, повышенного гемолиза эритроцитов и т.д.).

Повышение концентрации гемоглобина в крови (гиперхромемия) встречаются при эритремии, легочно-сердечной недостаточности, некоторых врожденных пороках сердца и сочетается обычно с увеличением количества эритроцитов.

При сгущении крови может наступить относительное увеличение концентрации гемоглобина.

Разрушение кровяных телец, которое в физиологических условиях происходит главным образом в селезенке, именуется гемолизом. В норме разрушению подвергаются эритроциты, которые уже состарились и соответствующим образом изменили свои физико-химические качества. Срок жизни эритроцитов в среднем 120 дней.

Эритроцит, погибая, выделяет железо, которое используется костным мозгом для образования новых красных кровяных телец. Следовательно, кость является не только опорой – скелета тела, но и очень важным кроветворным органом, «фабрикой», в которой красный мозг играет роль конвейера, штампующего миллиарды эритроцитов.

Рождение эритроцита – очень сложный процесс. Три стадии развития сопровождаются постепенным уменьшением объема ядра и одновременно заполнением клетки гемоглобином.

Как только из нормобласта исчезнет ядро, он становится ретикулоцитом (молодым эритроцитом). По мере его дальнейшего превращения все более снижается двигательная активность клетки.

Наконец, рекулоцит превращается в зрелый эритроцит, который и вымывается протекающей кровью в общий кровоток.

Кровь предварительно разводят 3,5% хлорида натрия с целью уменьшения числа клеток, подлежащих счету. Самым удобным и достаточно точным является способ разведения крови в пробирках.

В предварительно высушенную чистую коническую пробирку точно отмеривают пипеткой 4 мл разводящей жидкости и осторожно выдувают в нее 0,02 мл капиллярной крови (крови забирают пипеткой от гемометра Сали). Полученное разведение 1:202 можно практически принять равным 1:200.

Взвесь тщательно перемешивают и затем заполняют камеру для подсчета кровяных клеток.

Количество эритроцитов в 1 мкл крови рассчитывают под микроскопом.

Клинические значение определения эритроцитов

В норме в 1 мкл крови у мужчин содержится 4 000 000 – 5 000 000, у женщин 3 900 000 – 4 700 000 эритроцитов.

Увеличение количества эритроцитов в единице объема крови называется полиглобулией (эритроцитозом). В физиологических условиях полиглобулия наблюдается у новорожденных впервые 3 дня жизни.

Абсолютные полиглобулии (эритроцитозы) наблюдаются при гипоксических состояниях: врожденных пороках сердца, например стенозе устья легочной артерии (эти эритроцитозы вследствие постоянства и выраженности гипоксии могут быть значительными – до 8 000 000 – 9 000 000 , иногда выше миллионов эритроцитов в 1 мкл крови), некоторых приобретенных пороках сердца, выраженной эмфиземе легких, гипертонии малого круга кровообращения, тяжелых состояниях ожирения.

Клиническое значение определения лейкоцитов

В норме в 1мкл крови взрослого человека содержится от 4000 до 9000 лейкоцитов (у новорожденного количество лейкоцитов равно 12000-15000 в 1мкл, к 5 годам оно снижается до 10000, а с 10 лет устанавливается на том же уровне что и у взрослого).

Численность лейкоцитов в крови колеблется в течении дня, достигая максимума в вечерние часы. Увеличение количества лейкоцитов в крови называется лейкоцитозом, уменьшение – лейкопенией. Изменение числа лейкоцитов имеет значение тогда, когда оно значительно и обнаруживается повторно.

Лейкоцитоз характерен для следующих патологических состояний:

  • острых и хронических лейкозов;
  • острых инфекционных и воспалительных заболеваний, гнойных процессов;
  • инфаркта миокарда, обширных ожогов, злокачественных опухолей;
  • воздействий экзогенных токсических веществ;
  • значительных кровопотерь.

Лейкопения характерна для следующих состояний:

  • бактериальных инфекций, вирусных;
  • системной красной волчанки.

Клиническое значение определения количества тромбоцитов

В норме количество кровяных пластинок колеблется от 180 000 до 320 000 в 1 мкл крови. Эти колебания, отмечаемые у одного и того же человека, зависят от состояния вегетативной нервной системы и сосудистого и тонуса.

Увеличение количества тромбоцитов может быть связано с повышением образованием пластинок в костном мозге, а также с перераспределением их в кровяном русле.

В патологии увеличения количества тромбоцитов отмечается:

  1. Травме с размозжением мышц.
  2. Асфиксии (прекращение дыхания вследствие паралича дыхательного центра, закупорке дыхательных путей), ожогах, гемолитических кризисах, после кровотечений.
  3. После удаления селезенки.

Снижение числа кровяных пластинок (тромбоцитопения) может быть связано с перераспределением их по сосудистому руслу, с множественным образованием тромбоцитарных тромбов, повышенным распадом тромбоцитов, а также с пониженным их образования мегакариоцитами костного мозга. Уменьшение количества кровяных пластинок ниже критического уровня (менее 50 000 в 1 мкл крови) обычно сопровождается развитием геморрагического синдрома.

В патологии тромбоцитопения отмечается при следующих состояниях:

  • токсических, инфекционно – токсических, токсико-аллергических состояниях;
  • остром лейкозе.

Скорость оседания эритроцитов (СОЭ)

Скорость оседания эритроцитов (СОЭ) составляет 2-15 мм/ч женщин,1-10 мм/ч у мужчин. Следует иметь в виду, что некоторые физиологические состояния сопровождаются возрастанием СОЭ. Оно отмечается, например, после приема пищи (до 25мм/ч), при беременности (до 45мм/ч). Небольшое увеличение СОЭ может вызвать и голодание.

Клиническое значение определения СОЭ

В норме СОЭ у женщин составляет 2-15мм в час, у мужчин – 1-10 мм в час (более высокая норма СОЭ у женщин объясняется меньшим числом эритроцитов в женской крови, большим содержанием фибриногена и глобулинов). Повышение СОЭ сопровождается следующие заболевания:

  • инфекционно-воспалительные;
  • септические и гнойные процессы;
  • ревматизм;
  • заболевания почек;
  • инфаркт миокарда;
  • злокачественной опухоли;
  • различные анемии.

Понижение СОЭ, вплоть до полного прекращения оседания бывает при эритремии.

И все же информации, заключенной в выполненном почти в полном объеме общеклиническом анализе крови, для постановки точного диагноза заболевания иногда оказывается явно недостаточно. В таких случаях возникает необходимость в исследовании других биологических жидкостей, в частности мочи.

Источник: http://www.medroad.ru/krovenossnaja-sistema/obsheklinicheskoe-issledovanie-krovi.html

Методы исследования крови: гематологические анализы, биохимия крови, бактериологическое исследование, анализ крови на онкомаркеры и т.д

Особенности определения гемоглобина в крови, основные методы диагностики и лечения патологических состояний

Как выглядит кровь и что такое кровотечение знают все. А вот информацией, зачем она нужна, обладает далеко не каждый человек. Давайте попробуем разобраться с этим вопросом и рассмотреть в общих чертах методы самых важных и распространенных лабораторных исследований этой единственной жидкой ткани организма.

Функции крови Гематологический анализ крови – Биохимический анализ крови – Иммунологический анализ крови 3. Бактериологические анализы крови 4. Паразитологические виды исследования крови 5. Исследование системы свёртывания (гемостаза) 6. Анализы крови на онкомаркеры 7. Анализы крови, применяемые для исследования функций органов 8. Анализ крови на беременность

Функции крови

Итак, для чего нужна человеку кровь?

На кровь возложены многочисленные задачи по:

  • транспортировке кислорода и углекислого газа;
  • доставке различных питательных веществ к клеткам тела;
  • выведению вредных и ненужных продуктов обменных процессов,
  • регуляции температуры тела;
  • защите от болезнетворных организмов;
  • поддержке баланса электролитного и кислотно-щелочного равновесия;
  • поддержке формы тканей за счет наполнения сосудистого русла.

Вот далеко не полный перечень функций крови у человека.  Состоит она из жидкой части – плазмы (60%) и форменных элементов (40%), выполняющих множественные задачи в организме.

Важно: детальное исследование клеток и элементов крови может рассказать врачу об очень многих изменениях в теле человека. Именно поэтому существует большое количество способов анализа крови. Постараемся разобраться с их основным набором.

Забор крови для обследования производится из пальца (капиллярная кровь) или путем  внутривенной инъекции. В некоторых случаях проводят исследование крови, излившейся в полость (грудную, брюшную), также проводятся анализы выделений на скрытую кровь (кал, моча, рвотные массы).

Гематологический анализ крови

К этому виду диагностики относится общий (клинический) анализ крови.

С его помощью определяется:

  • количество красных кровяных телец (эритроцитов), находящегося в них гемоглобина со всеми его фракциями;
  • гематокритный показатель (отношение форменных элементов к объему);
  • подсчет лейкоцитов (белых кровяных клеток, играющих защитную роль), лейкоцитарной формулы, по изменению которой можно заподозрить множество заболеваний и патологических состояний;
  • количество эозинофилов, позволяющее делать выводы об аллергизации организма и наличия некоторых специфических инфекций.
  • число тромбоцитов – увеличение или уменьшение которых указывает на состояние свертывающей системы.

Более подробно клинический анализ крови разобран в статье Общий анализ крови: нормы, расшифровка анализа крови и подготовка к анализу.

Биохимический анализ крови

Это самый информативный вид исследования.

Он позволяет определить у обследуемого:

  • уровень содержания глюкозы (анализ крови на сахар), играющий важное значение в диагностике сахарного диабета и других заболеваний с нарушением обмена этого углевода;
  • холестерин – обязательный для клеток компонент, входящий в структуру клеточных мембран, выполняющий роль регулятора мембранной проницаемости. Избыточное его количество свойственно атеросклеротическим процессам, приводящим к инфарктам и инсультам. Недостаток его встречается при некоторых наследственных болезнях. Оценивается не только содержание чистого холестерина, но и его транспортных комплексов – липопротеинов;
  • триглицериды, повышение которых свойственно при ожирении, или наоборот, голодании, большой кровопотере, анемии, эндокринных расстройствах, болезнях почек, отравлениях и алкоголизме;
  • белки, в частности альбумины, повышающиеся при воспалениях, глобулины, часть которых увеличивается при недостатке железа. С-реактивный белок – показатель острой фазы воспалительной реакции. Иммуноглобулины – обнаружение которых свидетельствует о реакциях, связанных с аллергией, белки системы свертывания крови. Появление некоторых видов белков, а также нарушение их соотношения может свидетельствовать о целом ряде заболеваний;
  • остаточный азот. Азотемия – повышение содержания встречается при обезвоживании, при болезнях почек, туберкулёзе, сахарном диабете, цирротических изменениях печени, воспалений лёгких;
  • ферменты плазмы крови. Аминотрансферазы – аспартатаминотрансфераза (АСаТ), аланинаминотрансфераза (АЛаТ). Активность их нарастает преимущественно при болезнях сердца и печени. Лактатдегидрогеназа (ЛДГ), креатинкиназа – позволяют определять фазу течения инфаркта миокарда. Также диагностическое значение имеют и другие ферменты, более подробно о которых написано в статье о биохимическом анализе крови;
  • пигменты. Самый важный среди них – билирубин. Определение его величины  позволяет проводить диагностику болезней печени;
  • калий — уменьшение содержание этого элемента в крови свидетельствует об обезвоживании, длительном применении мочегонных препаратов, заболеваниях почек, обменных болезнях. Увеличение калия наблюдается при тяжелых травмах, ожогах;
  • натрий — снижается в анализе из-за недостаточного поступления с пищей, при обильной потере жидкости, ожогах, потоотделении, поносах, рвоте, приеме мочегонных. Увеличение наступает при сердечных проблемах, повышенном артериальном давлении, почечной недостаточности;
  • кальций, фосфаты — отклонение от нормы этих элементов бывает при различных патологиях – нарушениях обмена веществ, рахите, проблемах всасываемости в ЖКТ, почечной недостаточности и т.д.;
  • кислотно-щелочное состояние (КОС). По степени изменения этого показателя можно обнаружить состояние алкалоза и ацидоза в организме.

Иммунологический анализ крови

Обнаружение некоторых видов лимфоцитов и иммуноглобулиновых комплексов и анализ крови на антитела позволяют делать выводы о состоянии защитных сил организма. Лимфоциты участвуют в реакциях распознавания чужеродных антигенов (токсинов микроорганизмов и чужеродных веществ), а также в выработке антител (белковых образований, иммуноглобулинов), участвующих в нейтрализации ядов.

Обратите внимание: иммуноглобулины, специфические белки, антитела, находясь на мембранах лимфоцитов, в сыворотке крови и в тканевой жидкости, выполняют функции обезвреживания чужеродных бактерий, вирусов и ядов.

Иммуноглобулины делятся на 5 классов (А,M,G,D,E,).

Каждый класс выполняет присущие ему задачи:

  • иммуноглобулин А (Ig A) осуществляет защиту слизистых оболочек;
  • иммуноглобулин M (Ig M) характеризует начало патологического процесса;
  • иммуноглобулин G (Ig G) появляется как остаточный ответ иммунных сил на болезнетворное начало и может сохраняться повышенным всю жизнь;
  • иммуноглобулин Е (IgE) увеличивается при наличии паразитов;

Функции иммуноглобулина D находятся в фазе научного исследования.

Виды основных иммунологических методик исследования крови:

  • определение групп крови и резус-фактора;
  • определение реактивности (чувствительности) к неспецифическим возбудителям – реакция гемолитической активности (связывания) комплемента, содержания в крови некоторых факторов воспалительных реакций, определение белков острой фазы, разновидностей интерферона. Анализ фагоцитарной способности клеток белой крови;
  • анализ специфических иммунных ответов, проводится путем обнаружения разных видов Т и В лимфоцитов, отвечающих за иммунные реакции на клеточном уровне. Также исследуется количественный и качественный состав иммуноглобулинов, принимающих участие в гуморальном виде иммунитета, иммунные комплексы;
  • обнаружение С-реактивного белка, ревматоидного фактора и активности антистрептолизина, позволяющих проводить диагностику группы ревматических заболеваний;
  • серологические анализы – позволяют осуществлять диагностику сифилиса при помощи реакции микропреципитации (РМП), группы вирусных гепатитов, определения сальмонеллеза, дизентерии, тифа, дифтерии и др. специфических инфекций (реакция пассивной гемагглютинации и связывания комплемента).

Бактериологические анализы крови

Эти виды диагностики предусматривают забор крови и посев ее на различные питательные среды с последующим инкубированием от 10 дней до 6 недель. Результат позволяет обнаружить наличие в крови болезнетворных и условнопатогенных микроорганизмов – стафилококков, стрептококков, клебсиелл, сальмонелл и других бактерий.

Паразитологические виды исследования крови

Разработаны для обнаружения в крови простейших – возбудителей малярии, лейшманиоза, токсоплазмоза, возвратного тифа и других паразитических заболеваний, вызывающихся одноклеточными организмами.

Исследование системы свёртывания (гемостаза)

Анализы этой группы важны в хирургии, гинекологии, травматологии, комбустиологии, (медицинская специальность, занимающаяся лечением ожогов), ангиологии (болезни сосудистой системы).

Диагностика свертывания состоит из определения:

  • времени сворачиваемости крови, длительности и объема капиллярного кровотечения;
  • пробы на ломкость капилляров;
  • тромбоцитов, количества, размеров, агрегационно-адгезивных возможностей, тромбоцитарных факторов;
  • время плазменной рекальцификации;
  • дефицита факторов свертываемости;
  • основных физиологических антикоагулянтов.

Также оценивается состояние фибринолиза (способности крови к растворению сгустков). Эти показатели очень важны в практике кардиологии (при инфарктах миокарда), в неврологии (при инсультах головного мозга).

Анализы крови на онкомаркеры

Этими анализами определяются специфические вещества, которые выделяются опухолями. Также онкомаркерами могут выступать клетки, выделяемые нормальными тканями в ответ на наличие онкологического процесса. Чем выше содержание этих веществ, тем вероятнее наличие опухоли.

Важно: онкомарекры могут повышаться и при других болезнях, поэтому не всегда являются главным диагностическим критерием при обнаружении патологии.

При увеличении уровня необходимо проходить дополнительное исследование.

Обратите внимание: онкомаркеров обнаружено большое количество и идут дальнейшие научные разработки, усовершенствование методик определения.

Анализы крови, применяемые для исследования функций органов

При заболеваниях щитовидной железы определяют уровни выработки гормонов. Оценивается содержание трийодтиронина, тетрайодтиронина и тиреотропного гормона. Уровень их показателей помогает в диагностике таких заболеваний как тиреоидиты, диффузный токсический зоб, гипотиреоз и гипертиреоз. Анализы крови на гормоны щитовидной железы являются очень ценными для диагностики этих болезней.

Ниже указаны нормы минимального и максимального уровня гормонов в крови:

ГормонМинимальное значениеМаксимальное значение
Т3 свободный2,6 пмоль/л5,7 пмоль/л
Т3 общий1,2 нмоль/л2,2 нмоль/л
Т4 свободный9,0 пмоль/л22,0 пмоль/л
Т4 общий54 нмоль/л156 нмоль/л
ТТГ0,4 мЕд/л4 мЕд/л
Антитела к тиреоглобулину0 Ед/мл18 Ед/мл
Антитела к тиреоидной пероксидазе

Источник: https://okeydoc.ru/metody-issledovaniya-krovi/

Методы определения гемоглобина

Особенности определения гемоглобина в крови, основные методы диагностики и лечения патологических состояний

Маленькие колебания морфологического состава крови происходят в течение дня под влиянием приема пищи, работы и т. п. исходя из этого лучше брать кровь утром натощак либо при повторных изучениях неизменно в одно да и то же время и в однообразных условиях. При общеклиническом анализе крови определяют содержание в единице объема гемоглобина, эритроцитов.

лейкоцитов, их качественный состав, у некоторых больных и число тромбоцитов и ретикулоцитов. В один момент с общеклиническим анализом крови определяют реакцию оседания эритроцитов (см. Оседание эритроцитов). Кровь получают проколом кончика IV пальца левой руки, предварительно протертого спиртом.

Прокол создают на глубину 2,5—3 мм стерильным ланцетом либо иглой Франка со сменными стерилизованными лезвиями. Ограничиваться лишь протиранием лезвий спиртом запрещается, поскольку наряду с этим не уничтожается вирус инфекционного гепатита. Первую каплю крови стирают сухой ватой, последующие применяют.

Сперва набирают кровь в пипетку для определения гемоглобина, после этого в смесители либо пробирки для счета эритроцитов и лейкоцитов, после этого делают мазки для подсчета лейкоцитарной формулы, тромбоцитов и ретикулоцитов.
Определение гемоглобина создают разными способами в зависимости от имеющихся устройств, чаще всего гемометром (см.) ГС-3.

Кровь набирают в пипетку от прибора до метки 0,02 мл (20 мм 3 ), выдувают в градуированную пробирку, в которую предварительно налит до нижнего колечка 0,1 н. раствор соляной кислоты. и размешивают. По прошествии 5 мин. в пробирку по каплям приливают, помешивая, дистиллированную воду, пока цвет раствора не сравняется с цветом имеющегося в приборе стандарта.

Деление шкалы, на котором окажется нижний мениск жидкости, укажет на содержание гемоглобина в грамм-процентах (г%), другими словами в граммах на 100 мл крови. Прежнее выражение содержания гемоглобина в единицах (условных процентах) выходит из потребления.

Дабы перевести содержание гемоглобина, выраженное в единицах, в грамм-проценты, направляться не забывать, что 100 единиц соответствуют 16,67 2%, 1з%=6 единицам. Норма гемоглобина для дам 11,7— 15,8 г% (70—95 ед.), для мужчин 13,3-18 г% (80—108 ед.). При применении фотоэлектрического эритрогемометра смешивают 5 мл 0,1% раствора карбоната натрия и 40 мм 3 крови.

(2 пипетки от гемометра ГС-3). Смесь наливают в кювету с отметкой Г и поступают потом в соответствии с приложенным к прибору указаниям. Более правильным есть определение гемоглобина на электрофотоколориметре ФЭК-М. В пробирку, содержащую точно отмеренные 4 мл 0,04% раствора аммиака, прибавляют 20 мм 3 крови (1 пипетку от гемометра ГС-3).

Для получения 0,04% раствора аммиака берут 1,6 мл 25% раствора аммиака с удельным весом 0,91 и разбавляют водой до 1 л. Определение на ФЭК-М ведут при зеленом светофильтре в кювете шириной 10 мм, отсчет по красной шкале правого барабана (второй метод измерения). гемоглобина находят по градуировочной кривой либо таблице. Определение гемоглобина в особых фотоэлектрических устройствах (ГФ-1 и др.) детально обрисовано в приложенных к ним руководствах.

Рис. 1. Смеситель для эритроцитов. Рис. 2. Последовательные этапы (1—3) изготовление мазка крови. Стрелки показывают направление движения стекла.

Подсчет эритроцитов и лейкоцитов создают в счетной камере либо в устройствах автоматического счета. Для счета эритроцитов в камере приготовляют разведение крови 1:200, пользуясь смесителем (меланжером) либо пробиркой. Смесители для эритроцитов (рис.

1) и лейкоцитов являются пипетки с расширением (ампулой) в середине, где помещена бусинка, размешивающая кровь, и с метками, показывающими, до какого именно места набирать кровь и разводящую ее жидкость.

Для разведения эритроцитов берут смеситель для эритроцитов и насасывают кровь через резиновую трубку, надетую на его верхний конец, до метки 0,5, а после этого 3% раствор хлорида натрия до метки 101. При насасывании нужно доводить количество точно до меток; нельзя допускать появления пузырьков воздуха в ампуле.

Вам это понравится:

Для определения концентрации гемоглобина в крови используются:

— унифицированный гемиглобинцианидный метод;

— гемихромный метод – новый колориметрический метод, не содержащий в составе реагентов ядовитых цианистых соединений;

— гематологические анализаторы.

Распространенный в прошлом метод определения гемоглобина по Сали недостаточно точный и в настоящее время не применяется.

Определение концентрации гемоглобина крови унифицированным гемиглобинцианидным методом

Принцип. Гемоглобин при взаимодействии с железосинеродистым калием (красной кровяной солью) окисляется в метгемоглобин (гемиглобин), образующий с ацетонциангидрином соединение красного цвета – гемиглобинцианид, интенсивность окраски которого пропорциональна содержанию гемоглобина.

Реактивы.

1. Трансформирующий раствор: ацетонциангидрин – 0,5мг; калий железосинеродистый – 0,2г; натрия гидрокарбонат – 1,0г; дистиллированная вода — до 1л. Раствор стабилен при комнатной температуре в течение нескольких месяцев при хранении в посуде из темного стекла.

Методы исследования крови

При обесцвечивании и появлении осадка непригоден.

2. Калибровочный раствор гемиглобинцианида – для построения калибровочного графика (при использовании ФЭКа). В настоящее время для определения гемоглобина крови в большинстве клинико-диагностических лабораторий пользуются готовыми наборами реактивов, выпускаемыми рядом фирм.

Специальное оборудование: ФЭК или МИНИГЕМ-540.

Ход определения. В пробирку с помощью градуированной пипетки или автоматического дозатора наливают точно 5мл трансформирующего раствора и вносят в него 0,02мл (капилляр Сали) крови, промывая капилляр 2-3 раза трансформирующим раствором. Тщательно перемешивают содержимое пробирки.

При этом получается разведение крови в 251 раз. Колориметрируют содержимое пробирки через 20 минут на МИНИГЕМе-540 или на ФЭКе при условиях: светофильтр зеленый (длина волны 520-560 нм), кювета 10мм; против трансформирующего раствора.

При использовании ФЭКа содержание гемоглобина определяют по калибровочному графику.

Дата публикования: 2014-11-02; Прочитано: 4211 | Нарушение авторского права страницы

studopedia.org — Студопедия.Орг — 2014-2018 год.(0.001 с)…

Патологические формы гемоглобина

HbS – гемоглобин серповидно-клеточной анемии.

MetHb – метгемоглобин, форма гемоглобина, включающая трехвалентный ион железа вместо двухвалентного. Такая форма обычно образуется спонтанно, в этом случае ферментативных мощностей клетки хватает на его восстановление.

При использовании сульфаниламидов, употреблении нитрита натрия и нитратов пищевых продуктов, при недостаточности аскорбиновой кислоты ускоряется переход Fe2+ в Fe3+. Образующийся metHb не способен связывать кислород и возникает гипоксия тканей.

Для восстановления ионов железа в клинике используют аскорбиновую кислоту и метиленовую синь.

Hb-CO – карбоксигемоглобин, образуется при наличии СО (угарный газ) во вдыхаемом воздухе. Он постоянно присутствует в крови в малых концентрациях, но его доля может колебаться от условий и образа жизни.

Угарный газ является активным ингибитором гем-содержащих ферментов, в частности, цитохромоксидазы4-го комплекса дыхательной цепи.

HbA1С – гликозилированный гемоглобин. Концентрация его нарастает при хронической гипергликемии и является хорошим скрининговым показателем уровня глюкозы крови за длительный период времени.

Миоглобин тоже способен связывать кислород

Миоглобин является одиночнойполипептидной цепью, состоит из 153 аминокислот с молекулярной массой 17 кДа и по структуре сходен с β-цепью гемоглобина. Белок локализован в мышечной ткани.

Миоглобин обладает более высоким сродством к кислороду по сравнению с гемоглобином.

Это свойство обуславливает функцию миоглобина – депонирование кислорода в мышечной клетке и использование его только при значительном уменьшении парциального давления О2 в мышце (до 1-2 мм рт.ст).

Кривые насыщения кислородом показывают отличия миоглобина и гемоглобина:

  • одно и то же 50%-е насыщение достигается при совершенно разных концентрациях кислорода – около 26 мм рт.ст. для гемоглобина и 5 мм рт.ст. для миоглобина,
  • при физиологическом парциальном давлении кислорода от 26 до 40 мм рт.ст. гемоглобин насыщен на 50-80%, тогда как миоглобин – почти на 100%.

Таким образом, миоглобин остается оксигенированным до того момента, пока количество кислорода в клетке не снизится до предельныхвеличин. Только после этого начинается отдача кислорода для реакций метаболизма.

У гемоглобина есть молекулярные болезни

Серповидно-клеточная анемия

HbS – гемоглобин серповидно-клеточной анемии.

При этом нарушении в ДНК в результате точковой мутации триплет ЦТТ заменен на триплет ЦАТ, что влечет за собой включение в 6-м положении β-цепи вместоглутаматааминокислоты валина. Изменение свойств β-цепи влечет изменение свойств всей молекулы и формирование на поверхности гемоглобина “липкого” участка.

Методы определения количества гемоглобина в крови

При дезоксигенации гемоглобина участок “раскрывается” и связывает одну молекулу гемоглобина S с другими подобными. Результатом является полимеризация гемоглобиновых молекул и образование крупных белковых тяжей, вызывающих деформацию эритроцита и при прохождении капилляров гемолиз.

Схема отличия гемоглобина S от гемоглобина А и его полимеризация

Нарушение синтеза гемоглобина

Порфирии

Порфирии – это группа гетерогенных наследственных заболеваний, возникающих в результате нарушения синтеза гема и повышения содержания порфиринов и их предшественников в организме. Выделяютнаследственныеи приобретенныеформы порфирии.

Приобретенныеформы порфирий носят токсический характер и вызываются действием гексахлорбензола, солей свинца и других тяжелых металлов (ингибирование порфобилиногенсинтазы, феррохелатазы и др.), лекарственными препаратами (антигрибковый антибиотик гризеофульфин).

При наследственныхформах дефект фермента имеется во всех клетках организма, но проявляется только в одном типе клеток. Можно выделить две большие группы порфирий:

1. Печеночные– группа заболеваний с аутосомно-доминантными нарушениями ферментов различных этапов синтеза протопорфирина IX. Наиболее ярким заболеванием этой группы является перемежающаяся острая порфирия, при которой у гетерозигот активность уропорфириноген-I-синтазы снижена на 50%.

Заболевание проявляется после достижения половой зрелости из-за повышенной потребности гепатоцитов вцитохроме Р450 для обезвреживания половых стероидов, обострение состояния также часто бывает после приема лекарственных препаратов, метаболизм которых требует участия цитохрома Р450.

Потребление и снижение концентрации гема, необходимого для синтеза цитохрома Р450, активирует аминолевулинатсинтазу. В результате больные экскретируют с мочой большие количества порфобилиногена и аминолевулиновой кислоты. На свету порфириноген окисляется в окрашенные порфобилин и порфирин, и это является причиной потемнения мочи при ее стоянии на свету при доступе воздуха.

Симптомами являются острые боли в животе, запоры, сердечно-сосудистые нарушения, нервно-психические расстройства.

2. Эритропоэтические– аутосомно-рецессивные нарушения некоторых ферментов синтеза протопорфирина IX в эритроидных клетках.

При этом смещается баланс реакций образования уропорфириногенов в сторону синтеза уропорфириногена I.

Симптомы заболевания схожи с предыдущим, но дополнительно наблюдается светочувствительность кожи, обусловленная наличием уропорфириногенов, кроме этого отмечаются трещины на коже и гемолитические явления.

Талассемии

Для талассемий характерно снижение синтеза α-цепей гемоглобина (α-талассемия) или β-цепей (β-талассемия). Это приводит к нарушению эритропоэза, гемолизу и тяжелым анемиям.

Источник: https://magictemple.ru/metody-opredelenija-gemoglobina/

Гемоглобин (haemoglobinum)

Особенности определения гемоглобина в крови, основные методы диагностики и лечения патологических состояний

Мужчины — 130–160 г/л

Женщины — 120–140 г/л

Определение гемоглобина является одним из важнейших и основных лабораторных исследований. Наряду с подсчетом эритроцитов, это важнейший лабораторный показатель для оценки анемических состояний.

Гемоглобин — основной дыхательный белок крови, относящийся к хромопротеидам. Состоит из белковой (глобин) и небелковой (гем) части.

Он является белком четвертичной структуры и состоит из четырех субъединиц, каждая из которых включает полипептидную цепь, соединенную с гемом.

Полипептидные цепи попарно одинаковы: 2 цепи глобина типа α и 2 цепи глобина другого типа (β, γ и δ), соединенные с 4 молекулами гема.

Гем — это молекула протопорфирина ІХ, связанная с атомом железа. Каждый тетрамер гемоглобина может обратимо связывать и транспортировать не более 4-х молекул кислорода. 65 % гемоглобина образуется в эритроците в ядросодержащих стадиях созревания, 35 % — в стадию ретикулоцита. В стадии зрелого нормоцита синтез гемоглобина прекращается.

В настоящее время известно 3 главных подтипа гемоглобина: Hb А, Hb F и Hb А2. Основным является подтип А, который в норме составляет 96–98 % общего гемоглобина, тогда как Hb А2 составляет всего 23 %. Фетальный гемоглобин, преобладающий в крови новорожденного (Hb F), присутствует в крови у взрослого человека в количестве 1–1,5 %.

Кроме нормальных типов гемоглобина в настоящее время выделено еще около 20 его патологических вариантов. Как нормальные, так и патологические типы гемоглобина различаются не по структуре порфиринового кольца, а по строению глобина.

Существуют три основные группы методов определения количества гемоглобина:

  • колориметрические;
  • газометрические;
  • по содержанию железа в гемоглобиновой молекуле.

Ранее широко применялся колориметрический гематиновый метод, известный под названием метода Сали, который весьма несложен и удобен, но очень неточен.

В настоящее время используются главным образом циангемоглобиновые методы, в которых лучше всего сочетаются точность и техническая простота.

Газометрические методы и методы, основанные на определении железа точны, но требуют много времени и поэтому не нашли широкого практического применения.

Унифицированный метод определения гемоглобина, наиболее широко применяемый в клинических лабораториях Украины.

1. Принцип метода

Гемоглобин при взаимодействии с железосинеродистым калием окисляется в метгемоглобин, образующий с ацетонциангидрином окрашенный гемоглобинцианид, интенсивность окраски которого пропорциональна содержанию гемоглобина.

2. Реактивы:

а) трансформирующий раствор, содержащий ацетонциангидрин (0,5 мл), калий железосинеродистый (200 мг), бикарбонат натрия (1 г), дистиллированную воду (до 1000 мл). При появлении мути раствор не пригоден к употреблению;
б) стандартный раствор гемоглобинцианида — 5 мл. Концентрация гемоглобинцианида — 150 г/л.

3. Приготовление трансформирующего раствора

В мерную колбу на 1000 мл внести приблизительно 500 мл дистиллированной воды, количественно прибавить содержимое флакона смеси реактивов и содержимое 1 ампулы ацетонциангидрина, перемешать и дополнить дистиллированной водой до метки, перемешать и перелить в посуду для хранения. Хранить в прохладном, темном месте.

4. Ход определения

20 мкл крови прибавляют к 5 мл трансформирующего раствора, хорошо перемешивают, оставляют стоять 20 мин, после чего измеряют на фотоэлектроколориметре при длине волны 500–560 нм (зеленый светофильтр) в кювете с толщиной слоя 1 см против трансформирующего раствора или дистиллированной воды. Стандартный раствор колориметрируют без обработки.

5. Расчет

где 150 — концентрация гемоглобинцианида;Ест — экстинкция стандартного раствора;Епр — экстинкция пробы.

Результат выражается в г/л.

Определение количества гемоглобина в крови колориметрическим методом

Для ориентировочного определения гемоглобина крови иногда используют гемометр Сали (рис. 1)*. Метод основан на сравнении интенсивности окраски исследуемого раствора с интенсивностью окраски стандартного раствора. Гемоглобин крови под действием соляной кислоты превращается в солянокислый гематин, окрашивающий раствор в коричневый цвет.

Полученный раствор колориметрируют:

  • в градуированную пипетку наливают децинормальный раствор соляной кислоты до нижней круговой метки;
  • затем в пробирку с помощью капиллярной пипетки вносят 20 мкл исследуемой крови, полученной из пальца;
  • смесь крови с соляной кислотой тщательно перемешивают посредством легких ударов по нижнему концу пробирки. Наблюдают за изменением цвета крови в течение 5 минут;
  • по истечении этого времени жидкость осторожно разбавляют дистиллированной водой до тех пор, пока интенсивность ее окраски не совпадет с интенсивностью окраски стандартного раствора;
  • цифра шкалы на уровне нижнего мениска раствора показывает концентрацию гемоглобина в грамм-процентах (г%), грамм в литре (г/л) или в единицах Сали.

Данный метод является устаревшим, субъективным, требует регулярной проверки окраски стандартной шкалы и в настоящее время применяется редко.

Другие методы определения количества гемоглобина

На современном уровне развития методов диагностики совершенно недостаточно ограничиваться определением общего количества гемоглобина, так как в некоторых случаях определение качественного состава имеет решающее диагностическое значение.

Гемоглобин циркулирует в крови в форме нескольких производных.

Присоединение кислорода (к железу гема) приводит к образованию оксигемоглобина (HbO2). Отдав кислород тканям, оксигемоглобин превращается в восстановленную форму (HbO2 ↔ НHb).

Удаление углекислого газа из тканей происходит путем его присоединения к свободным аминным группам глобина и при этом образуется карбаминогемоглобин (карбгемоглобин).

Окись углерода (СО) присоединяется к железу гема, в результате чего образуется стойкое соединение карбоксигемоглобин. Окись углерода является продуктом обмена и образуется эндогенно при распаде гема (в норме при старении эритроцитов).

карбоксигемоглобина, в первую очередь, является показателем гемолиза. Железо гема находится в двухвалентной форме. При окислении его (Fe++ ↔ Fe+++) образуется метгемоглобин.

Окислителями железа гема могут быть различные продукты метаболизма — активные формы кислорода, ферменты, альдегиды и др. В норме за сутки образуется 2,5% метгемоглобина, а обнаруживается в крови 1,5%.

Метгемоглобинредуктазная система восстанавливает метгемоглобин, переводя его в восстановленную форму, возвращая тем самым способность транспортировать кислород.

К экзогенным метгемоглобинобразователям относятся нитриты, нитраты, присутствующие в избыточном количестве в воде, в пище, ряд лекарственных препаратов.

Гемоглобин, соединяясь с различными сульфопроизводными в комплексы, образует сульфметгемоглобин. У здоровых людей это производное гемоглобина не содержится в крови. Обнаружение его свидетельствует о повышенном содержании сульфопроизводных в воде, пище, воздухе. В связи с этим сульфметгемоглобин является маркером экологической обстановки.

Диагностическое значение имеет определение гликозилированных гемоглобинов, образующихся в результате комплексирования гемоглобина с различными углеводородами. 95 % от общего количества гликозилированных гемоглобинов приходится на долю гемоглобина А1с, образующегося в результате комплексирования гемоглобина и глюкозы.

Дифференциацию производных гемоглобина проводят спектроскопически.

Типы гемоглобина имеют большое значение не только для диагноза, но и перемещают вопрос о патогенезе анемии из чисто морфологической области в биохимическую.

Анемии, вызываемые появлением патологического типа гемоглобина, называются гемоглобинопатиями. К настоящему времени открыто более 600 аномальных гемоглобинов.

Известны гемоглобинопатии М, С, Д, «Волга», «Хельсинки» и др. Они могут быть качественными и количественными. Качественные возникают в результате замены аминокислот.

Количественные гемоглобинопатии обусловлены изменением скорости синтеза полипептидных цепей.

Норма:

у новорожденного — 136–196 г/л;у трехмесячного — 105–125 г/л;у ребенка в возрасте 1 года — 110–130 г/л;у ребенка в возрасте 10 лет — 115–148 г/л;у взрослого мужчины — 130–160 г/л;

у взрослой женщины — 120–140 г/л.

Пониженная концентрация гемоглобина в крови называется олигохромемией (или гемоглобинопенией). Наблюдается при:

  • анемиях (железодефицитной, гемолитической, гипопластической, В12-дефицитной);
  • острых кровопотерях (в первые сутки кровопотери из-за сгущения крови, обусловленного большой потерей жидкости, концентрация гемоглобина не соответствует картине истинной анемии);
  • скрытых кровотечениях;
  • злокачественных опухолях и их метастазах;
  • поражении костного мозга, почек и некоторых других органов;
  • в результате действия некоторых лекарственных препаратов, которые могут вызвать развитие апластической анемии (противоопухолевые, противосудорожные, тяжелые металлы, некоторые антибиотики, анальгетики) или способствовать развитию гемолиза (пенициллин, левомицетин, сульфаниламиды).

Гиперхромемия — редкое явление и не имеет большого клинического значения. Она встречается при:

  • первичных и вторичных эритроцитозах;
  • относительных эритроцитозах при дегидратации (декомпенсации сердца и т. д.).

На современном уровне развития методов диагностики совершенно недостаточно ограничиваться определением общего количества гемоглобина, так как в некоторых случаях определение качественного состава имеет решающее диагностическое значение.

Гемоглобин циркулирует в крови в форме нескольких производных. Присоединение кислорода (к железу гема) приводит к образованию оксигемоглобина (HbО2). Отдав кислород тканям, оксигемоглобин превращается в восстановленную форму (HbО2 ↔ НHb).

Удаление углекислого газа из тканей происходит путем его присоединения к свободным аминным группам глобина и при этом образуется карбаминогемоглобин (карбгемоглобин).

Окись углерода (СО) присоединяется к железу гема, в результате чего образуется стойкое соединение карбоксигемоглобин. Окись углерода является продуктом обмена и образуется эндогенно при распаде гема (в норме при старении эритроцитов).

карбоксигемоглобина, в первую очередь, является показателем гемолиза.

Железо гема находится в двухвалентной форме. При окислении его (Fe++ ↔ Fe+++) образуется метгемоглобин. Окислителями железа гема могут быть различные продукты метаболизма — активные формы кислорода, ферменты, альдегиды и др. В норме за сутки образуется 2,5 % метгемоглобина, а обнаруживается в крови 1,5 %.

Метгемоглобинредуктазная система восстанавливает метгемоглобин, переводя его в восстановленную форму, возвращая тем самым способность транспортировать кислород. К экзогенным метгемоглобинобразователям относятся нитриты, нитраты, присутствующие в избыточном количестве в воде, в пище, ряд лекарственных препаратов.

Гемоглобин, соединяясь с различными сульфопроизводными в комплексы, образует сульфметгемоглобин. У здоровых людей это производное гемоглобина не содержится в крови. Обнаружение его свидетельствует о повышенном содержании сульфопроизводных в воде, пище, воздухе. В связи с этим сульфметгемоглобин является маркером экологической обстановки.

Диагностическое значение имеет определение гликозилированных гемоглобинов, образующихся в результате комплексирования гемоглобина с различными углеводородами.

95 % от общего количества гликозилированных гемоглобинов приходится на долю гемоглобина А1с, образующегося в результате комплексирования гемоглобина и глюкозы.

Дифференциацию производных гемоглобина проводят спект роскопически.

Типы гемоглобина имеют большое значение не только для диагноза, но и перемещают вопрос о патогенезе анемии из чисто морфологической области в биохимическую.

Анемии, вызываемые появлением патологического типа гемоглобина, называются гемоглобинопатиями. К настоящему времени открыто более 600 аномальных гемоглобинов.

Известны гемоглобинопатии М, С, Д, «Волга», «Хельсинки» и др. Они могут быть качественными и количественными. Качественные возникают в результате замены аминокислот.

Количественные гемоглобинопатии обусловлены изме- нением скорости синтеза полипептидных цепей.

Жив ли Христос? Воскрес ли Христос из мертвых? Исследователи изучают факты

Источник: https://dyagnoz.ru/gemoglobin-haemoglobinum

Поделиться:
Нет комментариев

    Добавить комментарий

    Ваш e-mail не будет опубликован. Все поля обязательны для заполнения.